民国10年，哲英与友人到上海筹办中国红十字总会第一医院，她担任护理主任职务，医院初创条件差，缺乏资金和护理人员，哲英从业务到杂务均亲自动手。一个多月后，始有第一例宫外孕患者前来就诊，哲英日夜守护，精心护理，病人很快痊愈出院，出院后即登报感谢，使该院赢得群众的信任。同年，伍哲英在上海创建第一所由中国人办的中国红十字总会第一医院护士学校，伍哲英除担任校长和护理主任外，还亲自承担五门课程及实习指导。后又相继创办南洋护校、济民医院附设护校，并担任校长。后又在上海私立伯特利医院附属护校任校长。民国14年和民国18年曾先后代表中华护士会分别在芬兰、加拿大参加国际护士会员代表大会，并代表中国红十字会赴日本东京参加第二次远东红十字大会，当选本届大会副会长及护理委员会主席。民国17年，被选为护士会第八届理事会会长。她积极倡导护士学校推广普通话和学习英语。

抗日战争爆发，伍哲英带着无家可归的一批学生到上海第八伤兵医院为抗日伤病员服务，抢救了不少伤兵。民国27年春，伤兵医院撤退，哲英见到难童医院有四五十名失去父母的孤儿得不到适当的照顾，就主动留在该院工作，当时有一重病难童骨瘦如柴，在哲英精心救治下，孩子得救了，为感谢哲英抢救自己生命，遂改名伍琦。

中华人民共和国成立后，哲英仍担任上海六所护士学校顾问。她退居二线后，仍十分关心护理事业。她为中国护士事业奋斗不息，终身未婚，被誉为“护士之母”。1960年，伍哲英在上海病逝，享年76岁。